马外周血白细胞分离液说明书-上海研谨生物科技有限公司

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马外周血白细胞分离液说明书

更新时间：2016-08-11　点击量：1449

马外周血白细胞分离液说明书

（细胞培养及分子生物学）

【产品规格】

200ml/Kit

货号：WBC1094

【产品组成】

为方便广大用户使用，试剂内容如下：

			名称		产品编号		规格

	A	马外周血白细胞分离液					200ml

	B	样本稀释液（赠品）			2010C1119		200ml

	C	清洗液（赠品）			2010X1118		200ml

	D	红细胞裂解液（赠品）			NH4CL2009		100ml

	E	说明书					1 份

【实验前准备】
A．适用仪器
	zui大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
B．耗材

	产品名称			产品货号		产地

	15ml 离心管散装			339650		美国 NUNC

	15ml 离心管架装			339651		美国 NUNC

	50ml 离心管散装			339652		美国 NUNC

	50ml 离心管架装			339653		美国 NUNC

	无菌胶头滴管或塑料滴管

【检验方法】

全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。

首先取抗凝血，根据样本量大小，分以下两种情况：

情况 A：血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：

取一支 15ml 离心管，先加入 5ml 分离液

用吸管小心吸取血液样本加于分离液液面上，400-500g，离心 20-30min（注：如改

变血液样本及分离液用量，需相应调整离心力及离心时间，具体离心条件需客户自行摸

索，以达到zui理想分离效果。）

离心后用吸管小心吸取所有环状乳白色细胞层（一层或两层），加入 10 ml 清洗液（产品编号：2010X1118），混匀细胞。250g，离心 10min。重复洗涤 2-3 次，即得所需白细胞。

如有红细胞残留请使用红细胞裂解液（产品编号：NH4CL2009）裂解红细胞，具体操

作方法详见“红细胞裂解液使用说明”。

情况 B：血液样本量大于等于 5ml 时，实验方法如下：

取一支适当的离心管，先加入与样本等量的分离液。

将血液样本小心加于分离液之液面上，450-650g（zui大离心力可至 1000g），离心20-30min。（注：根据血液样本量确定离心条件，血液量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到zui理想分离效果。加入血液样本后，样本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二）。

剩余步骤同“情况 A”中步骤 3 与步骤 4。

【注意事项】

全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得zui理想的实验结果，在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

本实验不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。

分离液用量大于稀释后血液样本时，分离效果更佳。

当血液样本粘度过高需稀释时，*稀释方法：将血液与样本稀释液（产品编号：2010C1119）1:1 稀释混匀备用。注：不当的稀释方法会降低细胞得率及活性。如血液样本经过稀释则分离过程中需适当降低离心力和离心时间。

如实验后细胞得率或活性过低，请技术以寻求帮助。

【储存条件及有效期】

18-25℃保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启

封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。

【参考值（参考范围）】

本实验白细胞提取率及纯度大于 80%。

下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。

	红细胞		白细胞		血小板

		（4.0-10.0）×10⁹
含量（个/L）	（4.0-5.5）×10¹²	中性粒细胞	淋巴细胞	单核细胞	（1.0-3.0）×10¹¹
		50%-70%	20%-40%	3%-8%

【相关实验技术方案】

所获得白细胞的培养技术。

所获得白细胞的核酸提取技术。

所获得白细胞的鉴定方法A.流式细胞技术B.免疫组化技术C.原位杂交技术

D.PCR 技术

注：上述技术方案详情请登陆本公司搜索“细胞分离、

纯化、扩增、鉴定及生物治疗技术手册”，并在说明书项目栏下下载使用。

【可能存在的问题及解决方法】

1. 由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案如下表所示：

出现情况	出现原因	建议解决方案

离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层	转速过小或离心时间过短	适当增减转速

离心后目的细胞存在于分离液中	转速过大或离心时间过长
离心后目的细胞存在于分离液中	转速过大或离心时间过长

离心后白环层弥散	细胞密度过大	调整细胞密度

离心后白环层太浅或看不见	细胞密度过小
离心后白环层太浅或看不见	细胞密度过小

本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心，其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离心时间，对离心转速进行调整。

本分离液依照标准，全部使用药用级原料，性能指标与国产同类产品略有不同，可能出现红细胞沉降不*的情况，可以适当加大离心转速。

注：在对离心条件进行调整时，离心转速的加减以 50-100g 为基数，直至达到zui理想分离效果，

离心力zui小不得小于 400g，zui大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。

货号	品牌	产品名称
淋巴细胞分离液
LTS1077	TBD	人外周血淋巴细胞分离液内毒素<0.5EU
LTS1077-1	TBD	人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配置）
LTS10771		人外周血淋巴细胞分离液内毒素<0.25EU
LTS1077Z		人脏器组织淋巴细胞分离液KIT
LTS1077P		人肺癌组织淋巴细胞分离液KIT
LTS1077006		样本密度分离液（人外周血淋巴细胞分离液）医用级
LTS10770125		样本密度分离液（人外周血淋巴细胞分离液）医用
LTS1083	TBD	大鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1083P	TBD	大鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1083Z	TBD	大鼠肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1083PK		大鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1092	TBD	小鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1092P	TBD	小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1092Z	TBD	小鼠肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1092PK		小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒
HCLTS1092		小鼠淋巴细胞*培养基
CLTS1092		小鼠淋巴细胞无血清培养基
TBD10965MAC		兔肿瘤组织巨噬细胞分离液KIT
LTS10965	TBD	兔外周血淋巴细胞分离液试剂盒
LTS10965P	TBD	兔脏器组织淋巴细胞分离液
LTS10965Z	TBD	兔肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1079	TBD	狗外周血淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1079P	TBD	狗脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1079Z	TBD	狗肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1086	TBD	牛外周血淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1086P	TBD	牛脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1086Z	TBD	牛肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1085	TBD	豚鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒
LTS1085P	TBD	豚鼠脏器组织淋巴细胞分离液
LTS1085Z	TBD	豚鼠肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液
LTS1090C	TBD	鸡外周血淋巴细胞分离液
LTS1090CP	TBD	鸡脏器组织淋巴细胞分离液
LTS1078H	TBD	猴外周血淋巴细胞分离液
LTS1078HP	TBD	猴脏器组织淋巴细胞分离液
LTS1078HZ	TBD	猴肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液
LTS1110	TBD	猪外周血淋巴细胞分离液
LTS1110P	TBD	猪脏器组织淋巴细胞分离液
LTS1110C	TBD	猪肠黏膜组织淋巴细胞分离液
LTS1110Z	TBD	猪肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液
LTS1094	TBD	马外周血淋巴细胞分离液
LTS1094P	TBD	马脏器组织淋巴细胞分离液
LTS1094Z	TBD	马肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液
LTS1087	TBD	羊外周血淋巴细胞分离液
LTS1087P	TBD	羊脏器组织淋巴细胞分离液
LTS1087Z	TBD	羊肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液
LTS1080F	TBD	鱼全血淋巴细胞分离液
LTS1080FZ	TBD	鱼组织淋巴细胞分离液

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